摘要：本篇文章讨论了FDA关于生产过程分析技术（PAT）倡议中，快速微生物检查法在中间产品和最终产品质量监控中的作用。文章中强调了依靠微生物生长而导致培养时间较长的检查法的缺点。作者在文中简要阐述了几种候选的快速微生物检查法。作为风险评估的手段，作者指出了生产中哪些关键的微生物检验环节可采用快速微生物检查法。

    2001年11月，医学博士、美国FDA药品评价和研究中心（CDER）主任Janet Woodcock 概述了生产过程分析技术（PAT）组织，关于在美国制药工业中，促进药品生产过程研究和发展的改革，以达到改善药品质量目的的倡议。宗旨是提出与生产过程有关的药品质量问题，通过促进生产过程的改革创新以减少制药行业中的有害风险。

    PAT作为药品生产过程的分析和控制系统是依据生产过程中的周期性检测、关键质量参数的控制、原材料和中间产品的质量控制、及生产过程确保最终产品质量达到认可标准的程序。

    2003年10月23日，PAT小组委员会会议提出了PAT技术报告33号，主要内容是关于评价、确认和实施新的微生物检查法和PAT中快速微生物检查法的作用。并召开了PAT倡议中快速微生物方法（RMM）作用的讨论会，USP分析微生物专家委员会的成员Michael Korcynzski先生总结会议讨论的结果时，他强调了首要关注的应是制定法规部门对快速检查法的认可和新的微生物检查法论证的复杂性。

    在生物技术和制药工业中，微生物检验可分为两部分，第一是生产过程的监控，第二是产品出厂的检验。典型情况下，由于经典微生物检验周期太长,导致了生产过程监控和产品出厂检验的检验结果只作为产品放行评价的一部分内容，而不能及时用于指导生产过程。

经典微生物试验（略）

表1：生产过程的监控和产品出厂检验及其培养时间的例子（略）

   很显然，培养时间较长的微生物检查法不可能被PAT所采用。此外，由于生产过程和产品出厂的微生物检验的周期太长，即使采用最优的生产工艺、化学和物理替代方法监控生产过程以减少产品生产和出厂周期也是不可能的。例如，无菌产品的配液、无菌过滤和无菌分装一般只需1-2天，而无菌试验时间却需要14天。不依赖于微生物生长的快速检查法的到来预示着减少产品微生物污染的风险和缩短产品出厂周期机会的来临。

   PDA特别工作组简要地将微生物检查方法分为：利用微生物的生长；直接测定样品中存在的活微生物；根据细胞组成成分或采用诊断试剂进行检测；核酸分析法。（略）

   在PAT倡议中微生物学家的目标是确定某一制剂生产中的关键工艺步骤，同时应用RMM监控中间产品的生物负载以控制生产过程和减少微生物污染的风险。几种风险评估的程序可被采用，包括：食品工业中的危害分析和关键控制点（HACCP）、工程程序的失败模型和效果分析（FMEA）。（略）

   HACCP系统的焦点是将关键的产品安全区域作为总质量控制程序的一部分，以避免因污染微生物而导致微生物疾病的发生。整个生产过程涉及一个关键性检查，即测定产品生产的每一环节的产品其物理、化学指标和微生物污染水平对消费者造成不安全或人体不能接受的可能性。这些确定内容即关键控制点（CCP）.HACCP有七项原则，即分析危害性：确定各CCP；建立关键的限度标准；建立监控程序；建立偏差程序；建立验证程序；建立记录撰写及存档程序。（略）

   FMEA系统应用于制药工业中的例子可见于无菌试验用的隔离器日常应用的风险研究。采用数字表示方法，根据1）严重的，即不合格的结果，2）发生，即根据以往经验，有不合格的可能性，3）检测，即在线监控系统，并有可能测定到不合格的结果。（略）

   由于风险评估技术正式用于制药过程是一项新的领域，所以告戒使用者应避免将非关键技术不加选择地从其它行业照搬到制药工业中。作者希望制药工业的风险评估技术能在理性的环境中得以发展，并综合考虑药品生产和检验过程中的特殊要求。

众所周知在PAT中RMM的潜力，那么其发展、确认和实施的主要障碍是什么呢？障碍包括：

新的微生物检验技术不能提供标准试验方法所得到的预期结果。

药品微生物学家无法为某一使用目的评估和选择合适的方法。

如何确认RMM和论证其效果相当于药典方法无法取得一致意见。

当用RMM替代药典方法进行检验，结果不符合规定时，不同意接受产品按不合格处理的结论。

制药公司是不适合于风险法规的制订。

试验需要大量资金。

缺乏制药工业对RMM的真正参与。

过去缺乏制定法规部门的领导对PAT倡议的重视。

如何消除这些障碍呢？RMM研究部门必须与制药工业的对此有看法的领导加强交流以期可实施的RMM能够得到发展应用，微生物学家需要回顾PAT33号技术报告关于新的微生物检验方法的评价、验证及实施和USP的微生物检查替代法的在线工艺回顾验证。

制定合适的方案和细节并开始方法学的研究是科学的心声。方法之一，采用可比性（FDA指南，2003年2月，可比性方案-化学、制造和监控信息）证明从经典方法到RMM的方法学改变，可能是一种能被接受的方法。可比性方案的关键细节包括：设备验证（设计确认、安装确认和运行确认），试验的实施和标准的通过表明了两个比较的方法是相当的，RMM实施后如果发生变化应向制定法规的部门递交定期报告的计划。

微生物学家需要向制药公司说明投入RMM的研究，将得到：产品库存量减少、及少产品不合格、实验室及生产中的检验结果的快速分析、良好的产品质量。